Hematología con Carla

  1. PRUEBA DE LA SACAROSA I. PRINCIPIO Consiste en situar los hematíes en un medio de baja fuerza iónica, por lo que tienden a fijar el complemento, teniendo los hematíes, frente a este, una sensibilidad anormalmente alta. En este medio, los hematíes tienden a fijar el complemento y aquellos que son especialmente sensibles se lisan con facilidad. Prueba útil en el diagnóstico de alteraciones en la membrana eritrocitaria.    2. TEST DE ACIDIFICACIÓN DEL SUERO. PRUEBA DE HAM-DACIE I. PRINCIPIO El complemento es una proteína plasmática que al activarse por el complejo Ag-Ac provoca la lisis celular. Esta acción lítica es favorecida por un descenso del pH del medio (6,5-7) o de la fuerza iónica. En los hematíes normales, esta acción no aparece ni con el descenso del pH del medio. Solo sucede en la E-HPN (Hemoglobinuria Paroxística Nocturna), en la que aparece hemólisis significativa al acidificar el suero. Consiste en ver si se produce hemólisis de los hematíes al ser inc...

  A. DETERMINACIÓN DEL HIERRO SERICO (SIDEREMIA) I. OBJETIVO Determinar la sideremia: la cantidad de hierro en sangre, en el plasma, utilizando el espectrofotómetro. II. FUNDAMENTO Se trata de un método colorimétrico de la casa Spinreact que utiliza como muestra plasma.  Primero, se separa el hierro de la transferrina y a través del ácido ascórbico pasarlo a ión ferroso, que en presencia de Ferrozine forma un complejo coloreado cuya intensidad es proporcional a la concentración de hierro en la muestra. El procedimiento que seguimos es el llenado de las cubetas. A continuación se mezclan bien y se dejan incubar durante unos 10 minutos para por último medir su absorbancia en el espectrofotómetro. Para realizar los cálculos posteriores es importante saber que la concentración del patrón es de 100 µg/dl. B. DETERMINACIÓN DE CFTH (CAPACIDAD TOTAL DE FIJACIÓN DEL HIERRO)   I. FUNDAMENTO La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe 3+ y el exceso no fijado ...

  I. OBJETIVO Determinar la concentración de Hemoglobina, aprender hacer curvas de calibración y patrones para ello. También saber realizar medidas y cálculos matemáticos de absorbancia y concentración con el espectrofotómetro.   II. FUNDAMENTO Se basa en la transformación de la hemoglobina en CIANMETAHEMOGLOBINA, al añadir a la muestra de sangre ciertos componentes del reactivo de DRABKIN. En primer lugar, el Fe 2+ se oxida a Fe 3+ , dando lugar a metahemoglobina. Hb Fe (II)+ Fe (III) (CN) 6 3   -----------     Hb Fe (III)+ Fe (III) (CN) 6 4    Luego, en presencia de cianuro potásico, pasa a cianmetahemoglobina, de color rojo y con un pico de absorción máximo a 540 nm y cuya concentración puede ser determinada por métodos colorimétricos, empleando un patrón de concentración conocida. Hb Fe (III)+   CN -   --------- Hb Fe (III) CN