PRÁCTICA 19: DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE HIERRO (SIDEREMIA) Y CAPACIDAD E FIJACIÓN TOTAL DEL HIERRO (CTFH)

 

A. DETERMINACIÓN DEL HIERRO SERICO (SIDEREMIA)

I. OBJETIVO

Determinar la sideremia: la cantidad de hierro en sangre, en el plasma, utilizando el espectrofotómetro.

II. FUNDAMENTO

Se trata de un método colorimétrico de la casa Spinreact que utiliza como muestra plasma. 

Primero, se separa el hierro de la transferrina y a través del ácido ascórbico pasarlo a ión ferroso, que en presencia de Ferrozine forma un complejo coloreado cuya intensidad es proporcional a la concentración de hierro en la muestra.

El procedimiento que seguimos es el llenado de las cubetas. A continuación se mezclan bien y se dejan incubar durante unos 10 minutos para por último medir su absorbancia en el espectrofotómetro. Para realizar los cálculos posteriores es importante saber que la concentración del patrón es de 100 µg/dl.

B. DETERMINACIÓN DE CFTH (CAPACIDAD TOTAL DE FIJACIÓN DEL HIERRO)

 

I. FUNDAMENTO

La transferrina sérica se satura con un exceso de Fe³⁺ y el exceso no fijado se elimina por precipitación con carbonato magnésico (quelante), determinándose a continuación la cantidad total de hierro presente. La diferencia entre la capacidad de fijación total de hierro hallada (CFTH) y el hierro sérico inicial (Hb) nos da la capacidad de fijación de hierro no saturado o residual.